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外泌體（Exosome）是由不同細胞分泌的直徑30-150nm 的胞外膜性囊泡(Extrocellular Visicles，EVs）。外泌體普遍存在于多種體液中，其內(nèi)容物豐富，包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等，在細胞間信息交流中發(fā)揮著重要作用。近年來，液體活檢作為一種新的非侵入式主要檢測血液中循環(huán)腫瘤細胞（Circulating Tumor Cell，CTC）和循環(huán)腫瘤DNA(Circulating Tumor DNA，ctDNA)，獲取患者腫瘤病變信息，用以幫助診斷治療。研究表明，在外泌體中已檢測到基因組DNA 和線粒體DNA，通過提取和檢測外泌體中DNA突變，可作為液體活檢的另一種選擇。
外泌體提取和DNA分離試劑盒（Exosome Extraction & DNA Isolation Kit）結(jié)合我們的外泌體提取試劑，能夠從細胞培養(yǎng)上清或體液（血清/血漿等）中同時分離外泌體和循環(huán)DNA。利用優(yōu)化的裂解液提取已分離的外泌體DNA，采用吸附柱（Spin Columns）法方便、快捷地純化、洗脫外泌體DNA，可直接用于下游應(yīng)用，如real time PCR，Expression Array Assays，NGS等。
可獲得回收率、高純度游離DNA和外泌體相關(guān)DNA。
操作簡單、快捷，不需要額外儀器設(shè)備。
可小體積洗脫。
適合后續(xù)各種DNA實驗，如qPCR或數(shù)字
可簡單、快速富集各種樣本中游離DNA和外泌體顆粒。
可通過DNase I處理降解樣本中游離DNA，而外泌體中DNA不受影響，可單獨純化外泌體中DNA。
可應(yīng)用qPCR或數(shù)字PCR檢測和發(fā)現(xiàn)突變，應(yīng)用于液體活檢。
提取的DNA可用于構(gòu)建文庫及測序。
收集臨床診斷為腸癌患者，應(yīng)用“外泌體提取和DNA分離試劑盒”中外泌體提取試劑沉淀血漿中外泌體顆粒，分別經(jīng)過Dnase I處理和不經(jīng)過Dnase I處理來區(qū)分提取的外泌體相關(guān)DNA，應(yīng)用安捷倫2100 Bioanalyzer測定DNA分布圖（圖1），從中得出：外泌體提取試劑不僅能富集血漿中外泌體顆粒，同時血漿中游離DNA也能被沉淀下來，經(jīng)過Dnase I消化，可以降解血漿中游離DNA，但外泌體膜性結(jié)構(gòu)可阻止Dnase I對外泌體內(nèi)含物DNA消化。以提取的DNA為模板，應(yīng)用ARMS-PCR技術(shù)對KRas突變檢測（圖2），在KRas突變的腸癌患者中，檢測的Ct值較健康人小，同時經(jīng)過Dnase I處理，可提高腸癌患者與健康人Ct值差值（△Ct）檢測的特異性和靈敏度。
圖1：DnaseⅠ處理對外泌體相關(guān)DNA提取的影響
圖2：DnaseⅠ處理可提高外泌體相關(guān)DNA突變檢測的特異性
潤基生物在外泌體提取和DNA/RNA分離純化方面積累了豐富經(jīng)驗，結(jié)合我們的實驗條件，可以提供：
1、外泌體的提取和純化，外泌體定量（NTA和ELISA）。
2、外泌體核酸分離和純化，外泌體核酸檢測（qPCR或NGS）。
3、外泌體蛋白質(zhì)鑒定，如Western Blot,蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析等。
